KIF4A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-411788

概要

KIF4Aは、微小管およびクロマチンに結合して、有糸分裂紡錘体の組織化、染色体凝縮、ならびに後期（アナフェーズ）における染色体分配を協調的に制御するキネシンファミリーのモータータンパク質をコードします。細胞質分裂や紡錘体中央部（ミッドゾーン）のダイナミクス制御など、細胞周期における重要な過程に機能し、増殖分裂における正確なゲノム分配を支えます。KIF4Aの活性は、ゲノム安定性や複製ストレスの帰結に影響するDNA損傷応答およびクロマチンリモデリング経路とも交差します。KIF4Aの発現異常は、複数のがん研究の文脈で観察される増殖性の表現型やゲノム不安定性のシグネチャーと関連づけられており、有糸分裂に伴う脆弱性の機構解明研究において重要な標的となります。

KIF4A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKIF4A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KIF4A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KIF4Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KIF4Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KIF4Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KIF4A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KIF4Aの機能に不可欠なKIF4Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KIF4Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KIF4A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKIF4A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KIF4A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KIF4A HDRプラスミド（h）および KIF4A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKIF4Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKIF4A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。