Plasmide Double Nickase (h) KIF2A: sc-405146-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) KIF2A correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide KIF2A Double Nickase (h) et le plasmide KIF2A Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KIF2A. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: KIF2A Antibody (D-7): sc-271471
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) KIF2A | sc-405146-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) KIF2A | sc-405146-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KIF2A code une dép polymérase de microtubules de la famille des kinésines-13, qui régule la dynamique de l’extrémité « plus » des microtubules, l’assemblage du fuseau mitotique et la ségrégation des chromosomes pendant la mitose, contribuant à une progression correcte du cycle cellulaire. Dans des contextes post-mitotiques, KIF2A participe au guidage axonal, à la migration neuronale et au développement synaptique en remodelant les réseaux de microtubules et en coordonnant l’organisation du cytosquelette. Des liens fonctionnels situent KIF2A au sein de processus associés au transport dépendant des microtubules et au point de contrôle mitotique, qui façonnent la stabilité du génome et la polarité cellulaire. Une activité dérégulée de KIF2A a été associée à des phénotypes neurodéveloppementaux et est fréquemment étudiée dans des contextes pertinents pour le cancer, où une dynamique des microtubules altérée influence la prolifération et l’aneuploïdie.
KIF2A Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KIF2A dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KIF2A. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KIF2A. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KIF2A.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.