Keap1慢病毒激活颗粒(h): sc-400190-LAC

人类 KEAP1 基因编码 Keap1 蛋白。Keap1 是 CUL3–RBX1 E3 泛素连接酶复合体的底物衔接蛋白，负责调控 NRF2（NFE2L2）的蛋白酶体降解，从而精细校准抗氧化与外源性化合物应激反应。Keap1 通过其富含半胱氨酸的结构域感知亲电体和活性氧（ROS），进而调控 NRF2 的核内累积以及细胞保护性基因的转录，这些基因参与谷胱甘肽代谢、NADPH 再生和Ⅱ相解毒过程。KEAP1–NRF2 轴还可通过与 p62/SQSTM1 等蛋白的相互作用，将氧化还原稳态与代谢重编程、炎症信号以及自噬过程整合起来。KEAP1 依赖性对 NRF2 信号的调控失衡常见于氧化应激生物学相关研究中，例如致癌过程、与化疗耐受相关的表型，以及慢性组织损伤模型等。

Keap1 慢病毒激活颗粒（h）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 KEAP1 表达。

Keap1 慢病毒激活颗粒（h）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在KEAP1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性Keap1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 KEAP1 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。