KCTD3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412124

概要

KCTD3（potassium channel tetramerization domain containing 3）は、タンパク質間相互作用に関与するとされるBTB/POZドメイン含有タンパク質をコードしており、多タンパク質複合体の組み立てを形作ったり、プロテオスタシス（タンパク質恒常性）に影響を及ぼしたりする可能性があります。KCTDファミリーのメンバーは、しばしばcullin-3（CUL3）関連ユビキチンリガーゼの生物学や、標的分解（ターンオーバー）を介したシグナル伝達中間体の制御と結び付けて論じられており、経路の微調整や細胞恒常性における役割が示唆されます。こうした相互作用ネットワークを通じて、KCTD3は、ユビキチン化依存的な再編成が顕著な細胞増殖制御、ストレス応答、分化関連プログラムの研究において重要です。BTB/KCTDを中心とする複合体の機能不全は、がんや神経生物学領域における疾患関連表現型と関連付けられており、シグナル伝達の変調やタンパク質品質管理の機構モデルにおけるKCTD3の検討を後押しします。

KCTD3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKCTD3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KCTD3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KCTD3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KCTD3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KCTD3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KCTD3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KCTD3の機能に不可欠なKCTD3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KCTD3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KCTD3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKCTD3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KCTD3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KCTD3 HDRプラスミド（h）および KCTD3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKCTD3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKCTD3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。