Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
KCNQ4 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-403090
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- KCNQ4 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico KCNQ4, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: KCNQ4 Antibody (F-10): sc-271320
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
KCNQ4 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-403090 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
KCNQ4 codifica una subunità di canale del potassio voltaggio-dipendente (Kv7.4) che contribuisce alla corrente M e stabilizza il potenziale di membrana regolando l’efflusso di K⁺ nelle cellule eccitabili. L’attività del canale modella la generazione dei potenziali d’azione, l’eccitabilità cellulare e la segnalazione calcio-dipendente attraverso il controllo del potenziale di riposo e delle dinamiche di ripolarizzazione. KCNQ4 è fortemente legato alla fisiologia uditiva, in cui un’alterata funzione del canale perturba l’omeostasi ionica e l’eccitabilità nelle cellule ciliate cocleari e nei circuiti associati. Varianti genetiche o una disregolazione di KCNQ4 sono state associate a forme ereditarie di compromissione dell’udito, rendendolo un bersaglio rilevante per studi meccanicistici sulla trasduzione sensoriale e sulle vie di segnalazione neuronale.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO KCNQ4 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene KCNQ4 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del KCNQ4 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto KCNQ4 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina KCNQ4.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di KCNQ4 per lo studio della segnalazione di KCNQ4, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni KCNQ4 critici per la funzione di KCNQ4
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di KCNQ4 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal KCNQ4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal KCNQ4 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus KCNQ4. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal KCNQ4 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR KCNQ4 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia KCNQ4 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio KCNQ4 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.