JNK1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (bovine): sc-437283

概要

JNK1（MAPK8）は、ストレスによって活性化されるマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（MAPK）であり、サイトカイン、増殖因子、活性酸素種（ROS）、DNA損傷などからの上流シグナルを統合して、c-JunをはじめとするAP-1構成因子などの標的を介し、転写プログラムを制御します。ウシ細胞においてJNK1は、NF-κB、インスリンシグナル、TGF-β関連応答と交差するMAPKカスケードを調整することで、アポトーシス、炎症性シグナル伝達、分化の制御に寄与します。JNK1活性は、増殖、遊走、細胞外マトリックスのリモデリングなどの細胞応答にも影響を及ぼすため、組織ストレス、代謝恒常性の破綻、免疫活性化のモデルにおいて重要です。JNKシグナルの異常は、炎症性疾患や変性疾患などの病態と広く関連づけられており、経路に焦点を当てた研究における機構的ハブとしての有用性を裏づけています。

JNK1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（bovine）は、bovine細胞株における遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、JNK1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、JNK1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• JNK1の機能に不可欠なエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• JNK1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（bovine）およびJNK1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（bovine2）によってコードされるgRNAは、遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  JNK1 HDRプラスミド（bovine）および JNK1 HDRプラスミド（bovine2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定の標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。