JMJD5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405787
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- JMJD5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico JMJD5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:JMJD5 Anticorpo (D-5): sc-377078
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
JMJD5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405787 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KDM8 codifica a proteína JMJD5, que contém o domínio Jumonji C, uma oxigenase nuclear implicada na regulação da cromatina e no controle transcricional por meio de mecanismos associados à hidroxilação/desmetilação de lisina em histonas. A JMJD5 tem sido associada à progressão do ciclo celular, às respostas ao estresse de replicação e à coordenação de programas de expressão gênica que se cruzam com a sinalização de dano ao DNA e com a adaptação metabólica. Por meio dessas funções, a JMJD5 pode influenciar vias ligadas à proliferação e estados epigenéticos que são frequentemente alterados no câncer e em outros distúrbios envolvendo dinâmica da cromatina desregulada. Como resultado, KDM8/JMJD5 é amplamente estudado como um nó que conecta a regulação epigenética a saídas transcricionais dependentes do contexto e à aptidão celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO JMJD5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KDM8 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KDM8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KDM8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína JMJD5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KDM8 para a investigação da sinalização de JMJD5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KDM8 críticos para a função JMJD5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KDM8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo JMJD5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo JMJD5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KDM8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo JMJD5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR JMJD5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KDM8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KDM8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.