JAM-A Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421202-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- JAM-AO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase JAM-A (m) e o Plasmídeo Double Nickase JAM-A (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para F11r. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:JAM-A Anticorpo (J10.4): sc-53623
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
JAM-A Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421202-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JAM-A Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421202-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene F11r de camundongo codifica a molécula de adesão juncional A (JAM-A), uma proteína da superfamília das imunoglobulinas concentrada nas junções oclusivas (tight junctions), onde sustenta a integridade da barreira epitelial e endotelial e a polaridade celular. A JAM-A participa da montagem e do remodelamento das junções por meio de interações com proteínas de ancoragem (scaffold), como a ZO-1, e parceiros com domínio PDZ, influenciando processos como a permeabilidade paracelular e a sinalização dependente de contato. Em leucócitos e no endotélio vascular, a JAM-A contribui para a adesão e a dinâmica de transmigração, conectando a organização juncional ao tráfego inflamatório. A desregulação da expressão ou da localização de JAM-A/F11r tem sido associada a fenótipos de disfunção de barreira relevantes para inflamação, patologia vascular e modelos de invasão de células tumorais.
JAM-A O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus F11r em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de F11r. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função F11r. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com F11r interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.