JAB1 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-424107-NIC

마우스 Cops5는 COP9 시그날로솜의 금속단백질분해효소 서브유닛인 JAB1(CSN5)을 암호화하며, 컬린 탈네딜화(cullin deneddylation)를 촉매하여 cullin-RING E3 유비퀴틴 리가아제의 활성과 단백질 항상성(proteostasis)을 조절한다. 이러한 역할을 통해 JAB1은 AP-1 전사 프로그램의 조절 인자를 포함한 핵심 조절 단백질들의 분해(turnover)와 세포 내 위치를 제어함으로써 세포주기 진행, DNA 손상 반응, 그리고 신호전달 출력들을 조정한다. 또한 JAB1은 세포사멸, 스트레스 반응, 염증성 신호전달을 관장하는 경로들과도 연결되어, 유비퀴틴 의존적 조절을 상황 특이적인 전사 조절과 연계한다. CSN5/COP9 기능의 이상 조절은 여러 질환 관련 모델에서 비정상적 증식과 변화된 신호 상태와 연관되어 왔으며, 이로 인해 Cops5는 유비퀴틴–프로테아좀 경로 조절 메커니즘을 연구하는 데 자주 표적으로 사용된다.

JAB1 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Cops5 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Cops5 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Cops5의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Cops5 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.