ING2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404193

概要

ING2（inhibitor of growth family member 2）は核内の腫瘍抑制関連タンパク質であり、C末端のPHDフィンガーを介してクロマチンリーダーとして機能します。H3K4me3を認識し、DNA損傷シグナル伝達および細胞周期制御に関連する転写プログラムを協調的に制御します。ING2はヒストンアセチルトランスフェラーゼ／デアセチラーゼ複合体と相互作用し、p53依存的なストレス応答を調節することでエピジェネティック制御に関与し、アポトーシス、細胞老化、ゲノム安定性に影響を与えます。さらに、遺伝毒性ストレス後のクロマチンアクセシビリティ制御や修復因子のリクルートに関わる経路との関連も示されています。ING2の発現や機能の異常は複数のがんで報告されており、分子レベルでのがん化、転移能、治療抵抗性機構への寄与が研究されています。

ING2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるING2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ING2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ING2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ING2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ING2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ING2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ING2の機能に不可欠なING2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ING2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ING2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびING2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ING2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ING2 HDRプラスミド（h）および ING2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはING2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のING2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。