Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IMP-1/IGF2BP1 Double Nickase Plasmid (h): sc-401703-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IMP-1/IGF2BP1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IMP-1/IGF2BP1 Double-Nickase-Plasmid (h) und IMP-1/IGF2BP1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IGF2BP1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IMP-1/IGF2BP1: sc-166344
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IMP-1/IGF2BP1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-401703-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IMP-1/IGF2BP1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401703-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IGF2BP1 (IMP-1) ist ein konserviertes RNA-bindendes Protein, das m6A-modifizierte Transkripte erkennt und die Lokalisation, Stabilität und Translation von mRNAs wachstums- und motilitätsassoziierter Gene reguliert. Über Interaktionen mit zytoskelettalen und Ribonukleoprotein-Komplexen trägt es dazu bei, posttranskriptionelle Programme zu koordinieren, die mit Proliferation, Migration und epithelial-mesenchymaler Plastizität verbunden sind, einschließlich nachgeschalteter Effekte auf die Signalausgänge der PI3K–AKT- und MAPK-Wege. Die Expression von IGF2BP1 ist in mehreren Tumortypen häufig erhöht und wurde mit invasivem Verhalten sowie veränderten metabolischen und Stressantwort-Phänotypen in Verbindung gebracht. Daher wird IGF2BP1 intensiv in der Krebsbiologie, der RNA-Epitranskriptomik und in Mechanismen untersucht, die das Schicksal von RNA mit Zellzustandsübergängen koppeln.
IMP-1/IGF2BP1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IGF2BP1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IGF2BP1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IGF2BP1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IGF2BP1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.