IL-27Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-424540

概要

Il27ra は、マウスのインターロイキン27受容体α鎖（IL-27Rα、WSX-1 とも呼ばれる）をコードしており、gp130 と対になって機能的な IL-27 受容体複合体を形成するサイトカイン受容体サブユニットです。IL-27Rα シグナル伝達は JAK/STAT 経路（とくに STAT1 および STAT3）を介して T 細胞分化を制御し、Th1/Th17 に関連する炎症プログラムを調節するとともに、複数の免疫細胞種におけるサイトカイン産生に影響を与えます。これらの過程を通じて、IL-27Rα は免疫恒常性、抗原刺激に基づく応答、ならびに炎症のフィードバック制御の調節に寄与します。IL-27/IL-27Rα シグナルの破綻は、自己免疫病態、慢性炎症、感染に伴う免疫機能障害のモデルで関与が示されており、免疫学研究における機序解明の要所（メカニスティック・ノード）として有用であることが示唆されています。

IL-27Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIl27ra遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Il27ra内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Il27raのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IL-27Rαタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IL-27Rαシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Il27ra欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IL-27Rαの機能に不可欠なIl27raエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Il27raゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IL-27Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIL-27Rα CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Il27ra遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IL-27Rα HDRプラスミド（m）および IL-27Rα HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIl27raホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIl27ra標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。