IL-1RII CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2): sc-421099-KO-2

Übersicht

Il1r2 kodiert den murinen Interleukin‑1‑Rezeptor Typ II (IL‑1RII), einen hochaffinen Köderrezeptor, der IL‑1α und IL‑1β bindet und proinflammatorische Signale abschwächt, indem er die Ligandenverfügbarkeit für die IL‑1R1/IL‑1RAcP‑Signaltransduktion begrenzt. Durch die Dämpfung der IL‑1‑vermittelten Aktivierung der NF‑κB‑ und MAPK‑Signalwege trägt IL‑1RII zur Ausprägung von Zytokinnetzwerken, zur Rekrutierung von Leukozyten und zur Aktivierung der angeborenen Immunantwort in myeloiden und stromalen Kompartimenten bei. Eine veränderte Regulation von IL‑1RII wurde über Effekte auf das Zytokingleichgewicht und das entzündliche Gewebemilieu mit entzündlichen und autoimmunen Phänotypen in Verbindung gebracht. Il1r2 wird daher in Mausmodellen eingesetzt, um Mechanismen zu untersuchen, die die IL‑1‑Antwort steuern, die Biologie von Köderrezeptoren sowie die Auflösung versus Persistenz von Entzündungen.

Das IL-1RII CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Il1r2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Il1r2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Il1r2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IL-1RII-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Il1r2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IL-1RII-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Il1r2-Exone abzielen, die für die IL-1RII-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Il1r2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom IL-1RII CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom IL-1RII CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Il1r2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IL-1RII HDR-Plasmid (m) und IL-1RII HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Il1r2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Il1r2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.