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IL-15慢病毒激活颗粒(m) | sc-421089-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Il15 基因编码白细胞介素-15(IL-15)。IL-15 是一种多效性细胞因子,可通过 IL-15Rα 介导的“反式呈递”(transpresentation)将信号传递给由 IL-2/15Rβ 与共同 γ 链组成的受体复合体,从而支持 NK 细胞和记忆性 CD8+ T 细胞的发育、生存与活化。其下游信号主要涉及 JAK1/JAK3-STAT5 通路,同时 PI3K–AKT–mTOR 与 MAPK 通路也有贡献,共同塑造淋巴细胞的增殖、细胞毒功能以及代谢适应性。IL-15 还会影响髓系细胞的活化以及炎症组织内的细胞因子网络,连接先天与适应性免疫反应。在慢性炎症、自身免疫、感染与肿瘤免疫等背景下,IL-15 表达与信号传导失调被广泛研究,被认为可驱动免疫细胞组成及活化状态的改变。
IL-15 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Il15 表达。
IL-15 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Il15转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性IL-15表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Il15 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。