IL-13Rα2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-402525

Übersicht

IL13RA2 kodiert den Interleukin‑13‑Rezeptor Alpha 2 (IL‑13Rα2), einen hochaffinen IL‑13‑bindenden Rezeptor, der die Typ‑2‑Zytokin‑Signalübertragung an der Zelloberfläche moduliert. Im Gegensatz zum signalgebenden IL‑13Rα1/IL‑4Rα‑Komplex, der JAK/STAT6‑abhängige Transkriptionsprogramme aktiviert, wird IL‑13Rα2 häufig als Decoy‑Rezeptor oder als kontextabhängige Signalkomponente beschrieben, die die Verfügbarkeit von IL‑13, den Rezeptortransport (Trafficking) und nachgeschaltete Antworten beeinflusst, die mit Entzündung und Gewebeumbau in Verbindung stehen. IL‑13Rα2 wurde mit Signalwegen assoziiert, die die Organisation der extrazellulären Matrix, Zellmigration und das Crosstalk in der Immunmikroumgebung regulieren. Eine veränderte IL13RA2‑Expression wurde bei entzündlichen Erkrankungen und in mehreren Tumorarten berichtet, was IL13RA2 zu einem nützlichen Ziel für die Untersuchung der Zytokin‑Responsivität und krankheitsrelevanter zellulärer Phänotypen in humanen Modellsystemen macht.

Das IL-13Rα2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des IL13RA2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des IL13RA2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von IL13RA2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IL-13Rα2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von IL13RA2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IL-13Rα2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf IL13RA2-Exone abzielen, die für die IL-13Rα2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere IL13RA2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom IL-13Rα2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom IL-13Rα2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des IL13RA2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IL-13Rα2 HDR-Plasmid (h) und IL-13Rα2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von IL13RA2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten IL13RA2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.