IL-13Rα2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402525
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-13Rα2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-13Rα2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-13Rα2 Anticorpo (2K8): sc-134363
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-13Rα2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402525 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
IL13RA2 codifica o receptor alfa 2 da interleucina-13 (IL-13Rα2), um receptor de alta afinidade para ligação à IL-13 que modula a sinalização de citocinas do tipo 2 na superfície celular. Ao contrário do complexo sinalizador IL-13Rα1/IL-4Rα, que ativa programas transcricionais via JAK/STAT6, o IL-13Rα2 é frequentemente descrito como um receptor “isca” (decoy) ou como um componente de sinalização dependente do contexto, influenciando a disponibilidade de IL-13, o tráfego do receptor e respostas a jusante ligadas à inflamação e ao remodelamento tecidual. O IL-13Rα2 tem sido associado a vias que regulam a organização da matriz extracelular, a migração celular e o diálogo (crosstalk) no microambiente imunológico. Alterações na expressão de IL13RA2 foram relatadas em condições inflamatórias e em múltiplos tipos de tumores, tornando-o um alvo útil para estudar a responsividade a citocinas e fenótipos celulares relevantes para doenças em sistemas modelo humanos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-13Rα2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IL13RA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IL13RA2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IL13RA2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-13Rα2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IL13RA2 para a investigação da sinalização de IL-13Rα2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IL13RA2 críticos para a função IL-13Rα2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IL13RA2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-13Rα2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IL-13Rα2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IL13RA2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-13Rα2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IL-13Rα2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IL13RA2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IL13RA2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.