IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406442
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- IL-12Rβ2 Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im IL-12Rβ2-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IL-12Rβ2: sc-293379
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-406442 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
IL12RB2 kodiert die Beta-2-Kette des Interleukin-12-Rezeptors (IL-12Rβ2), eine Signaluntereinheit, die sich mit IL-12Rβ1 zum funktionsfähigen IL-12-Rezeptorkomplex auf T-Zellen und NK-Zellen zusammenschließt. Nach Bindung von IL-12 aktiviert der Rezeptor eine JAK2/TYK2-abhängige STAT4-Signalkaskade und fördert damit die Th1-Polarisierung, die IFN-γ-Produktion sowie zytotoxische Immunprogramme, die die zellvermittelte Immunität prägen. Die Expression von IL-12Rβ2 und die Signalübertragungskompetenz beeinflussen Differenzierung und Effektorfunktionen in entzündlichen und tumorassoziierten Immunmikroumgebungen und verknüpfen diese Achse mit Immundysregulation sowie veränderten Anti-Pathogen- bzw. Anti-Tumor-Antworten. Eine fehlregulierte IL12RB2-Aktivität wurde im Kontext chronischer Entzündung, Immunflucht und Infektionsanfälligkeit infolge beeinträchtigter, STAT4-gesteuerter Transkriptionsnetzwerke untersucht.
Das IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des IL12RB2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des IL12RB2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von IL12RB2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IL-12Rβ2-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von IL12RB2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IL-12Rβ2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf IL12RB2-Exone abzielen, die für die IL-12Rβ2-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere IL12RB2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom IL-12Rβ2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des IL12RB2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IL-12Rβ2 HDR-Plasmid (h) und IL-12Rβ2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von IL12RB2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten IL12RB2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.