IL-12Rβ2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406442
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-12Rβ2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-12Rβ2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-12Rβ2 Anticorpo (2H6): sc-293379
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-12Rβ2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406442 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
IL12RB2 codifica a cadeia beta 2 do receptor de interleucina-12 (IL-12Rβ2), uma subunidade de sinalização que se associa à IL-12Rβ1 para formar o complexo receptor funcional de IL-12 em células T e células NK. Após a ligação da IL-12, o receptor ativa a via de sinalização STAT4 dependente de JAK2/TYK2, promovendo a polarização Th1, a produção de IFN-γ e programas imunes citotóxicos que moldam a imunidade mediada por células. A expressão de IL-12Rβ2 e a competência de sinalização influenciam a diferenciação e as funções efetoras em microambientes imunes inflamatórios e associados a tumores, ligando esse eixo à desregulação imune e a respostas anti-patógeno ou antitumorais alteradas. A atividade desregulada de IL12RB2 tem sido estudada em contextos de inflamação crônica, evasão imune e suscetibilidade a infecções, por meio do comprometimento de redes transcricionais impulsionadas por STAT4.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-12Rβ2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IL12RB2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IL12RB2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IL12RB2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-12Rβ2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IL12RB2 para a investigação da sinalização de IL-12Rβ2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IL12RB2 críticos para a função IL-12Rβ2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IL12RB2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-12Rβ2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IL-12Rβ2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IL12RB2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-12Rβ2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IL-12Rβ2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IL12RB2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IL12RB2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.