IL-1 beta/IL1B Plasmide Double Nickase (m): sc-421097-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IL-1 beta/IL1B Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IL-1 beta/IL1B Double Nickase Plasmid (m) e il IL-1 beta/IL1B Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Il1b. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IL-1 beta/IL1B Antibody (B122): sc-12742
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IL-1 beta/IL1B Plasmide Double Nickase (m) | sc-421097-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-1 beta/IL1B Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421097-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il1b nel topo codifica l’interleuchina‑1 beta (IL‑1β), una potente citochina pro‑infiammatoria prodotta principalmente da cellule mieloidi attivate e convertita nella sua forma matura in seguito al clivaggio della caspasi‑1 dipendente dall’inflammasoma. La segnalazione di IL‑1β attraverso i complessi del recettore dell’IL‑1 induce l’attivazione delle vie NF‑κB e MAPK, promuovendo la trascrizione di chemochine, molecole di adesione e ulteriori citochine che coordinano il reclutamento dei leucociti e l’amplificazione dell’immunità innata. Questo asse è strettamente collegato alla piroptosi, alle risposte febbrili e al crosstalk con le reti di TNF e IL‑6, contribuendo a modellare l’infiammazione e il rimodellamento tissutale. Una produzione deregolata di IL‑1β è ampiamente utilizzata come readout molecolare nei modelli murini di infezione, sindromi autoimmuni e autoinfiammatorie, infiammazione metabolica e processi neuroinfiammatori.
IL-1 beta/IL1B Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Il1b nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Il1b. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Il1b. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Il1b interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.