IL-1 beta/IL1B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400078-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-1 beta/IL1BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IL-1 beta/IL1B (h) e o Plasmídeo Double Nickase IL-1 beta/IL1B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IL1B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-1 beta/IL1B Anticorpo (B122): sc-12742
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-1 beta/IL1B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400078-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-1 beta/IL1B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400078-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano IL1B codifica a interleucina-1 beta (IL-1β), uma potente citocina pró-inflamatória produzida como um precursor inativo que é maturado por proteólise após a ativação do inflamassoma e a atividade da caspase-1. A sinalização de IL-1β por meio do IL-1R1 e de proteínas acessórias desencadeia cascatas dependentes de MyD88, incluindo as vias de NF-κB e MAPK, para induzir citocinas secundárias, quimiocinas e moléculas de adesão que coordenam respostas imunes inatas. IL1B está intimamente ligado ao recrutamento de células inflamatórias, à resposta febril e à remodelação tecidual, e sua expressão desregulada está associada à fisiopatologia inflamatória crônica e autoimune. Como um nó central em redes de citocinas, IL1B é amplamente estudado na biologia de macrófagos, na sinalização do inflamassoma e em modelos de inflamação estéril e de ativação imune induzida por infecção.
IL-1 beta/IL1B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IL1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IL1B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IL1B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IL1B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.