IFN-γR2 Double Nickase Plasmid (m): sc-421052-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IFN-γR2 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IFN-γR2 Double-Nickase-Plasmid (m) und IFN-γR2 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Ifngr2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IFN-γR2 Double Nickase Plasmid (m) | sc-421052-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IFN-γR2 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-421052-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Ifngr2 kodiert den murinen Interferon-γ-Rezeptor 2 (IFN-γR2), eine essentielle Signalkomponente des heterodimeren IFN-γ-Rezeptorkomplexes, die die zelluläre Ansprechbarkeit auf IFN-γ ermöglicht. Nach Ligandenbindung an IFNGR1/IFNGR2 aktivieren assoziierte JAK-Kinasen STAT1 und induzieren so interferon-stimulierte Genprogramme, die Antigenpräsentation, Makrophagenaktivierung und zellintrinsische antimikrobielle Abwehrmechanismen prägen. Dieser Signalweg koordiniert angeborene und adaptive Immunität und beeinflusst die Differenzierung von Leukozyten sowie Zytokinnetzwerke. Eine Fehlregulation der IFN-γ–JAK/STAT-Signalübertragung ist mit entzündlichen und autoimmunen Phänotypen verbunden und kann Wirt–Pathogen-Interaktionen verändern, was Ifngr2 zu einem zentralen Knotenpunkt für die Immunologie- und Infektionsforschung macht.
IFN-γR2 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Ifngr2-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Ifngr2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Ifngr2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Ifngr2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.