Plásmido Doble Nickase (m) IFI-204: sc-421033-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)IFI-204 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IFI-204 (m) y el plásmido de doble nickasa IFI-204 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Ifi204. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) IFI-204 | sc-421033-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) IFI-204 | sc-421033-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Ifi204 codifica IFI-204, un miembro murino inducible por interferón de la familia p200 que actúa como regulador de la inmunidad innata sensible a los ácidos nucleicos. IFI-204 participa en la detección de ADN citosólico y en la modulación de programas génicos estimulados por interferón, configurando la señalización aguas abajo a través del eje STING–TBK1–IRF3 y de redes transcripcionales inflamatorias relacionadas. Más allá de la respuesta a patógenos, IFI-204 se ha asociado con el control de la progresión del ciclo celular, la diferenciación y programas vinculados a la senescencia en contextos inmunitarios y estromales. Por ello, la actividad desregulada de IFI-204 es relevante en modelos de autoinflamación, defensa antiviral y señalización inmunitaria asociada a tumores, donde las vías de interferón y la detección de ADN influyen en los fenotipos de enfermedad.
IFI-204 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Ifi204 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Ifi204. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Ifi204. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Ifi204 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.