IFI-202 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-424028

概要

マウス Ifi202b は、自然免疫の制御および細胞運命決定の調節に関与するとされる p200（PYHIN）ファミリーのインターフェロン誘導性メンバーである IFI-202 をコードします。IFI-202 は、DNA 損傷応答、細胞周期の進行、アポトーシスシグナルの調節との関連が報告されており、炎症性遺伝子発現を形作るインターフェロン／ISG ネットワークとも機能的につながっています。免疫細胞やインターフェロン刺激下の状況では、Ifi202b 活性の変化が免疫恒常性の破綻と関連し、マウスモデルにおける自己免疫様表現型や炎症性疾患機序との関係で研究されてきました。

IFI-202 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIfi202b遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ifi202b内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ifi202bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IFI-202タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IFI-202シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ifi202b欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IFI-202の機能に不可欠なIfi202bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ifi202bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IFI-202 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIFI-202 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ifi202b遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IFI-202 HDRプラスミド（m）および IFI-202 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIfi202bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIfi202b標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。