ICMT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406029

개요

ICMT(이소프레닐시스테인 카복실 메틸트랜스퍼레이스)는 소포체(ER)에 국소화된 효소로, CAAX 단백질의 C-말단에서 단백질분해가 일어난 뒤 프레닐화된 시스테인 잔기의 메틸 에스터화를 촉매합니다. 이는 단백질 프레닐화의 최종 단계에 해당합니다. 이 변형은 소형 GTPase 및 관련 신호 단백질의 막 결합성과 세포내 수송(트래피킹)을 조절하여 RAS/MAPK, PI3K–AKT, 세포골격 조절과 같은 경로에 영향을 미칩니다. ICMT는 프레닐화 기질의 위치와 활성을 조절함으로써 세포 성장, 극성, 소포 수송의 제어에 기여합니다. 프레닐화 동역학의 변화와 ICMT 의존적 가공 과정은, 잘못된 위치로 이동한 프레닐화 단백질이 세포 항상성을 교란하는 암유발성 신호 및 기타 질환과 연관되어 있는 것으로 보고되었습니다.

ICMT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 ICMT 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 ICMT 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 ICMT의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ICMT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ICMT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 ICMT 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ICMT 기능에 중요한 ICMT 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 ICMT 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ICMT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 ICMT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 ICMT 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ICMT HDR 플라스미드 (h) 및 ICMT HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 ICMT 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 ICMT 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.