HuR/ELAV1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400141-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HuR/ELAV1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HuR/ELAV1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HuR/ELAV1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ELAVL1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HuR/ELAV1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400141-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HuR/ELAV1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400141-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ELAVL1 (HuR/ELAV1) codifica uma proteína de ligação a RNA que reconhece elementos ricos em AU e regula a expressão génica pós-transcricional ao controlar a estabilidade do mRNA, o splicing, a exportação nuclear e a tradução. A HuR transita entre o núcleo e o citoplasma e é modulada por sinalização responsiva ao stress e por fosforilação, moldando programas génicos envolvidos na progressão do ciclo celular, respostas a danos no DNA, inflamação e diferenciação. Ao estabilizar transcritos que codificam citocinas, fatores de crescimento e reguladores de sobrevivência, a HuR integra regulões de RNA que influenciam a adaptação celular a sinais do microambiente. A atividade desregulada de ELAVL1 e a localização alterada de HuR têm sido associadas a sinalização oncogénica, estados inflamatórios crónicos e vias relevantes para doenças neurodegenerativas e cardiovasculares, sustentando o seu amplo uso como um nó mecanístico na biologia do RNA.
HuR/ELAV1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ELAVL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ELAVL1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ELAVL1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ELAVL1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.