HtrA4 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-436033-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HtrA4O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HtrA4 (m) e o Plasmídeo Double Nickase HtrA4 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Htra4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HtrA4 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-436033-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HtrA4 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-436033-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Htra4 de camundongo codifica a protease serina secretada HtrA4 (família HtrA), uma enzima de controle de qualidade que cliva proteínas mal dobradas ou danificadas e ajuda a regular a proteostase extracelular e pericelular. As proteases HtrA se conectam a programas de resposta ao estresse, incluindo sinalização ligada à resposta a proteínas mal dobradas (UPR), e podem influenciar vias associadas a fatores de crescimento e à matriz que moldam a sobrevivência celular, a adesão e o remodelamento tecidual. Alterações na expressão de HtrA4 têm sido relatadas em contextos de inflamação, biologia vascular e fisiologia reprodutiva/placentária, sustentando seu uso como um nó mecanístico em estudos focados em estresse e microambiente. Em modelos murinos, a perturbação de HtrA4 pode ajudar a dissecar o remodelamento impulsionado por proteases e o crosstalk de sinalização relevantes para disfunção tecidual associada a doenças.
HtrA4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Htra4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Htra4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Htra4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Htra4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.