HSP70-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417733-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSP70-2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSP70-2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HSP70-2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSPA1B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSP70 Anticorpo (F-3): sc-373867
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSP70-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417733-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSP70-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417733-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPA1B codifica a proteína de choque térmico induzível HSP70-2, uma chaperona molecular central dependente de ATP que estabiliza proteínas recém-sintetizadas e desnaturadas por estresse para preservar a proteostase. A HSP70-2 participa da resposta ao choque térmico por meio de transcrição regulada por HSF1 e coordena decisões de dobramento, redobramento e triagem com co-chaperonas e com as vias de ubiquitina–proteassoma e de autofagia. Ao limitar a agregação proteica e modular a sinalização de estresse, a HSP70-2 influencia a sobrevivência celular sob condições de estresse proteotóxico, oxidativo e inflamatório. A atividade desregulada da rede HSP70 tem sido associada a alterações na tolerância ao estresse e na homeostase proteica em diversos contextos relevantes para doenças, incluindo neurodegeneração, adaptação de células cancerosas ao estresse e perturbações da sinalização imune.
HSP70-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSPA1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSPA1B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSPA1B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSPA1B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.