Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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HSP 40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402810
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSP 40 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HSP 40, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSP 40 Anticorpo (B-3): sc-398766
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSP 40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402810 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DNAJB1 codifica a co-chaperona humana HSP40 (homólogo de DnaJ, subfamília B, membro 1), um regulador-chave da proteostase que estimula a atividade ATPase da HSP70 para promover o dobramento, o redobramento e a triagem de proteínas cliente mal dobradas. Por meio de sua interação dependente do domínio J com a HSP70, a HSP40 sustenta o controle de qualidade de proteínas no citosol, as respostas ao estresse e a coordenação da degradação assistida por chaperonas via proteassoma e vias ligadas à autofagia. A função de DNAJB1 é relevante para a resiliência celular durante choque térmico e outros estresses proteotóxicos, e redes de chaperonas alteradas são frequentemente implicadas em doenças de agregação proteica e na adaptação ao estresse oncogênico. Um evento recorrente associado a doença envolvendo DNAJB1 é a fusão DNAJB1–PRKACA observada no carcinoma fibrolamelar, destacando o valor de modelos focados em DNAJB1 para estudar a biologia de chaperonas em contextos genéticos definidos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HSP 40 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DNAJB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DNAJB1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DNAJB1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HSP 40.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DNAJB1 para a investigação da sinalização de HSP 40, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DNAJB1 críticos para a função HSP 40
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DNAJB1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HSP 40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HSP 40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DNAJB1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HSP 40 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HSP 40 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DNAJB1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DNAJB1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.