HSF4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403850-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSF4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSF4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HSF4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSF4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSF4 Anticorpo (A-12): sc-398645
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSF4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403850-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSF4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403850-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSF4 (fator de transcrição do choque térmico 4) é um fator de transcrição que se liga ao DNA e coordena a proteostase ao regular proteínas de choque térmico e outros genes responsivos ao estresse, com papéis de destaque em programas de diferenciação celular. Em tecidos oculares, o HSF4 contribui para a maturação das células de fibra do cristalino e para a manutenção da homeostase proteica, processos intimamente ligados à organização do citoesqueleto, a redes de chaperonas e à proteção contra a agregação de proteínas. A atividade desregulada do HSF4 tem sido associada a opacidades hereditárias do cristalino e a fenótipos relacionados à catarata, refletindo a sensibilidade do cristalino a perturbações no controle de qualidade proteica. Como um nó em circuitos transcricionais de resposta ao estresse, o HSF4 é estudado por seus efeitos em transições de estado celular, na regulação transcricional sob estresse proteotóxico e em perfis de expressão de chaperonas a jusante.
HSF4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSF4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSF4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSF4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSF4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.