Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
HMG-1/HMGB1 Antibody (D-3): sc-518191. Western blot analysis of HMG-1 expression in A-431 (A), NIH/3T3 (B) and PC-12 (C) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgG2b BP-HRP: sc-542741.
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HMG-1/HMGB1双切口酶质粒(m): sc-420871-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HMG-1/HMGB1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- HMG-1/HMGB1双切酶质粒（m）和HMG-1/HMGB1双切酶质粒（m2）编码针对Hmgb1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HMG-1/HMGB1: sc-56698，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HMG-1/HMGB1双切口酶质粒(m) | sc-420871-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HMG-1/HMGB1双切口酶质粒(m2) | sc-420871-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Hmgb1 编码与染色质相关的蛋白 HMG-1/HMGB1。该蛋白是一种 DNA 结合的结构性因子，能够使 DNA 弯曲并稳定核蛋白复合物，从而调控转录、复制、重组以及 DNA 修复。HMGB1 参与染色质重塑和损伤应答通路，包括协调碱基切除修复与双链断裂修复信号传导；当其释放到细胞外时，还可影响炎症信号。HMGB1 活性失调与异常细胞因子反应、神经炎症及肿瘤生物学有关，因此常被用于先天免疫、应激反应与基因组维护等研究。在小鼠模型中，对 Hmgb1 的扰动常用于探究细胞死亡程序、无菌性炎症，以及与发育和疾病相关情境中的转录调控。
HMG-1/HMGB1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Hmgb1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Hmgb1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Hmgb1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Hmgb1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。