HLA-DOβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406402
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HLA-DOβ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HLA-DOβ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HLA-DOβ Anticorpo (DOB.L1): sc-69739
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HLA-DOβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406402 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O HLA-DOB codifica a subunidade HLA-DOβ, que se associa à HLA-DOα para formar o heterodímero HLA-DO, expresso principalmente em células apresentadoras de antígeno. Em endossomos tardios e lisossomos, o HLA-DO modula a atividade do HLA-DM para ajustar finamente o carregamento de peptídeos nas moléculas de MHC de classe II, moldando o repertório de peptídeos exibidos às células T CD4+. Essa regulação relaciona a HLA-DOβ ao processamento e à apresentação de antígenos, à tolerância imune adaptativa e às respostas imunológicas a infecções. Alterações na edição de peptídeos pelo MHC de classe II e variações na região HLA são relevantes para estudos de autoimunidade, mecanismos de doenças inflamatórias e interações tumor–sistema imune, em que a qualidade da apresentação de antígenos influencia o reconhecimento imunológico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HLA-DOβ (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HLA-DOB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HLA-DOB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HLA-DOB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HLA-DOβ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HLA-DOB para a investigação da sinalização de HLA-DOβ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HLA-DOB críticos para a função HLA-DOβ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HLA-DOB para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HLA-DOβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HLA-DOβ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HLA-DOB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HLA-DOβ Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HLA-DOβ (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HLA-DOB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HLA-DOB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.