Histone Deacetylase 10 (HDAC10) Plasmide Double Nickase (h): sc-403221-NIC

HDAC10 codifica per l’istone deacetilasi 10, una deacetilasi istonica zinco-dipendente che modula l’accessibilità della cromatina e i programmi trascrizionali rimuovendo gruppi acetile dagli istoni e da altri substrati proteici. In quanto deacetilasi di classe II con ruoli citoplasmatici di rilievo, HDAC10 è stata collegata alla regolazione dell’autofagia, delle risposte al danno del DNA e dell’adattamento allo stress cellulare, influenzando vie che controllano proliferazione e sopravvivenza. Alterazioni dell’espressione o dell’attività di HDAC10 sono state associate a cambiamenti dello stato epigenetico e a reti di segnalazione metaboliche e immunitarie osservate in molteplici contesti patologici, inclusi la biologia del cancro e i processi neuroinfiammatori. Queste funzioni rendono HDAC10 un bersaglio utile per analizzare il controllo epigenetico dell’espressione genica e i fenotipi a valle in modelli cellulari umani.

Histone Deacetylase 10 (HDAC10) Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HDAC10 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HDAC10. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HDAC10. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.

Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HDAC10 interrotto.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.