HIF1a Lentiviral Activation Particles (h): sc-400036-LAC

HIF1Aは、低酸素誘導因子1α（HIF1α）をコードしており、低酸素状態に対する細胞応答を統合する、酸素感受性の中核的な転写因子である。低酸素下では安定化したHIF1αがARNTと二量体を形成し、低酸素応答エレメント（HRE）に結合して、血管新生、解糖、赤血球産生、pH恒常性、細胞生存を制御する遺伝子群を調節する。また、PI3K–AKT–mTOR経路、MAPK経路、ならびにVHLに媒介されるプロテオスタシス経路とも交差する。HIF1αの活性は代謝リプログラミング、ミトコンドリア機能、活性酸素種（ROS）の制御を形作り、ストレス性の微小環境における細胞運命決定に影響を与える。HIF1Aシグナルの破綻は、腫瘍の適応、炎症性リモデリング、虚血に伴う細胞ストレス、異常な血管反応や線維化反応など、病的低酸素に関わる広範な生物学的現象と関連している。

HIF1a レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なHIF1Aの発現上昇を可能にします。

HIF1a レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、HIF1A転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性HIF1aの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のHIF1Aゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。