HGF 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400433-NIC

간세포 성장인자(HGF)는 분비되는 다기능성 사이토카인을 암호화하며, MET 수용체 티로신 키나아제의 고친화성 리간드로 기능한다. HGF–MET 신호전달은 PI3K–AKT, RAS–MAPK, STAT 및 초점접착 의존성 경로를 활성화하여 세포 생존, 증식, 운동성, 형태형성, 그리고 상피–간엽 간 상호작용을 조절한다. 조직 손상 상황에서 HGF는 재생 프로그램과 기질–상피 간 크로스토크에 기여하며, 이는 세포외기질 리모델링과 혈관신생 반응을 형성한다. HGF 발현의 이상 조절 또는 MET 경로 활성의 비정상은 종양성 침윤 및 전이 생물학, 섬유화성 리모델링, 염증 연관 병리와 연결되어 있어, HGF는 미세환경 신호전달의 기전을 연구하는 데서 자주 표적이 된다.

HGF 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 HGF 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 HGF 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 HGF의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, HGF 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.