Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Hec1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406844
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Hec1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Hec1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Hec1 Anticorpo (C-11): sc-515550
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Hec1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406844 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene NDC80 codifica a Hec1, um componente essencial do cinetócoro externo que forma o complexo NDC80 e acopla diretamente os microtúbulos do fuso aos cromossomos durante a mitose. A Hec1 coordena a alinhamento (congressão) e a segregação cromossômica ao sustentar ligações estáveis do tipo “extremidade‑a‑extremidade” (end-on) com os microtúbulos e ao contribuir para a sinalização do checkpoint de montagem do fuso, mantendo assim a integridade do genoma. A interrupção ou desregulação da Hec1 perturba a progressão mitótica, aumenta a instabilidade cromossômica e se relaciona com vias que controlam a aneuploidia e os checkpoints do ciclo celular. Esses processos são frequentemente investigados em estudos de distúrbios proliferativos e de biologia de células tumorais, nos quais a função do cinetócoro e a fidelidade mitótica estão alteradas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Hec1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NDC80 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NDC80, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NDC80 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Hec1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NDC80 para a investigação da sinalização de Hec1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NDC80 críticos para a função Hec1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NDC80 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Hec1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Hec1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NDC80. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Hec1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Hec1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NDC80 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NDC80 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.