Hbb-bh1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420804
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Hbb-bh1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Hbb-bh1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Hbb-bh1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420804 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Hbb-bh1 codifica uma subunidade globínica embrionária do tipo β que contribui para a montagem da hemoglobina e o transporte de oxigênio durante o início do desenvolvimento do camundongo. Sua expressão é regulada ao longo do desenvolvimento dentro do cluster de genes da β-globina e coordenada com programas de diferenciação eritroide controlados por reguladores transcricionais e epigenéticos. Hbb-bh1 participa do equilíbrio heme–globina e da homeostase redox em eritrócitos primitivos, vinculando-se a vias que influenciam a maturação eritrocitária e respostas ao estresse oxidativo. A desregulação da troca de expressão (switching) de genes de globina e da composição da hemoglobina é relevante para a modelagem de hemoglobinopatias e para o estudo de mecanismos que moldam a especificação da linhagem eritroide.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Hbb-bh1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Hbb-bh1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Hbb-bh1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Hbb-bh1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Hbb-bh1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Hbb-bh1 para a investigação da sinalização de Hbb-bh1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Hbb-bh1 críticos para a função Hbb-bh1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Hbb-bh1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Hbb-bh1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Hbb-bh1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Hbb-bh1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Hbb-bh1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Hbb-bh1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Hbb-bh1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Hbb-bh1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.