HAUSP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-434244

개요

마우스 Usp7 유전자는 HAUSP를 암호화하는데, HAUSP는 유비퀴틴 특이적 프로테아제로서 p53–MDM2 축을 포함해 유전체 무결성과 전사 조절에 핵심적인 조절因자들로부터 유비퀴틴을 제거함으로써 단백질 안정성과 신호 전달 역학을 조절한다. HAUSP는 유비퀴틴–프로테아좀 경로의 제어, DNA 손상 반응, 복제 스트레스 대응, 그리고 세포주기 진행과 아폽토시스에 영향을 미치는 크로마틴 관련 과정에 관여한다. 체크포인트 신호 및 복구에 관여하는 인자들을 탈유비퀴틴화함으로써 Usp7은 유전독성 스트레스와 온코진 활성화 이후의 세포 운명을 형성하는 데 기여한다. USP7/HAUSP 활성의 이상 조절은 실험 모델에서 종양억제 네트워크의 변화, 면역 및 염증 신호의 균형 교란, 그리고 보다 광범위한 암 관련 표현형과 연관되어 왔다.

HAUSP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Usp7 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Usp7 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Usp7의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HAUSP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HAUSP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Usp7 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HAUSP 기능에 중요한 Usp7 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Usp7 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HAUSP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 HAUSP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Usp7 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HAUSP HDR 플라스미드 (m) 및 HAUSP HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Usp7 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Usp7 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.