Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Gβ 5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420611
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Gβ 5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Gβ 5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Gβ 5 Anticorpo (C-6): sc-515379
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gβ 5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420611 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Gnb5 codifica a subunidade Gβ5, um componente beta atípico de proteínas G que forma complexos obrigatórios com proteínas RGS da família R7 para acelerar a hidrólise de GTP em Gα e tornar mais precisa a terminação do sinal de receptores acoplados à proteína G (GPCR). Em células de camundongo, os complexos Gβ5–RGS regulam a cinética e a amplitude da sinalização ligada a cAMP e Ca²⁺ a jusante de receptores de neurotransmissores e sensoriais, modulando a excitabilidade neuronal e a transmissão sináptica. Por meio do controle de vias acionadas por GPCR, Gβ5 influencia processos de sinalização em nível de rede, incluindo neuromodulação e adaptação a estímulos. A desregulação da sinalização associada a GNB5 tem sido relacionada a fenótipos do neurodesenvolvimento e sensoriais, sustentando sua relevância em estudos mecanísticos sobre a temporização de GPCR e a função de circuitos neuronais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Gβ 5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Gnb5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Gnb5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Gnb5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Gβ 5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Gnb5 para a investigação da sinalização de Gβ 5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Gnb5 críticos para a função Gβ 5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Gnb5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Gβ 5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Gβ 5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Gnb5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Gβ 5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Gβ 5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Gnb5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Gnb5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.