GSTM2 Plasmide Double Nickase (h): sc-404795-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GSTM2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GSTM2 Double Nickase Plasmid (h) e il GSTM2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GSTM2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: GSTM2 Antibody (E-9): sc-376486
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GSTM2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404795-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GSTM2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404795-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La glutatione S-transferasi mu 2 (GSTM2) è un enzima citosolico di detossificazione di fase II che catalizza la coniugazione del glutatione a xenobiotici elettrofili e a prodotti endogeni della perossidazione lipidica, sostenendo l’omeostasi redox e la difesa cellulare contro lo stress ossidativo. Come parte della rete del metabolismo del glutatione, GSTM2 contribuisce alla biotrasformazione di intermedi reattivi e può influenzare la suscettibilità cellulare al danno ossidativo e alla segnalazione associata all’infiammazione. Le variazioni nell’espressione o nell’attività di GSTM2 sono state collegate a differenze interindividuali nella sensibilità alle sostanze chimiche e nelle risposte allo stress, ed è frequentemente studiata in contesti in cui le specie reattive dell’ossigeno e il carico di elettrofili plasmano fenotipi rilevanti per la malattia. Nella biologia dei tumori e nella ricerca in tossicologia, GSTM2 viene inoltre esaminata per il suo ruolo nel modulare le risposte alle esposizioni ambientali e le vie del metabolismo dei farmaci, senza implicare esiti clinici.
GSTM2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GSTM2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GSTM2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GSTM2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GSTM2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.