GSTM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-418201

概要

GSTM1は、グルタチオンS-トランスフェラーゼmu 1（GSTM1）をコードする遺伝子であり、求電子性の外来化学物質（キセノバイオティクス）や内因性の反応性中間体に対してグルタチオン抱合を触媒する第II相解毒酵素です。酸化ストレスや脂質過酸化に由来する付加体の生成を抑えることで、GSTM1は細胞のレドックス恒常性の維持に寄与し、医薬品、環境化学物質、炎症の副産物の代謝を支えます。その活性は、グルタチオン依存性の抗酸化経路やより広範な細胞保護的ストレス応答と交差し、酸化的DNA損傷に対する感受性にも影響します。GSTM1の遺伝的欠失または発現低下は、個体間における毒性物質の処理能力の差と関連づけられており、酸化ストレスや発がん物質曝露が疾患リスクに寄与する状況で研究されています。

GSTM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGSTM1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GSTM1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GSTM1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GSTM1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GSTM1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GSTM1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GSTM1の機能に不可欠なGSTM1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GSTM1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GSTM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGSTM1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GSTM1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GSTM1 HDRプラスミド（h）および GSTM1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGSTM1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGSTM1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。