granzyme B Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420745-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- granzyme BO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase granzyme B (m) e o Plasmídeo Double Nickase granzyme B (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Gzmb. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:granzyme B Anticorpo (2C5): sc-8022
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
granzyme B Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420745-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
granzyme B Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420745-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino **Gzmb** codifica a **granzima B**, uma protease serina citotóxica armazenada em grânulos líticos de células T CD8+ ativadas e de células NK, e liberada nas sinapses imunes para eliminar células-alvo. Após a entrega ao citosol mediada por perforina, a granzima B cliva substratos-chave para desencadear programas apoptóticos e inflamatórios, incluindo a ativação de caspases e a proteólise de proteínas intracelulares que amplificam a sinalização de morte celular. A atividade de **Gzmb** é central para a função efetora de linfócitos citotóxicos e molda a imunidade antígeno-específica, com ampla relevância para a vigilância imunológica, a imunopatologia e a lesão tecidual em contextos inflamatórios. A expressão ou atividade desregulada da granzima B tem sido associada a alterações na citotoxicidade de células imunes e pode influenciar a gravidade de inflamação do tipo autoimune, respostas a infecções e interações tumor–sistema imune em modelos murinos.
granzyme B O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Gzmb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Gzmb. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Gzmb. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Gzmb interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.