granzyme A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (bovine): sc-437323

概要

グランザイムA（GZMA）はトリプターゼ型のセリンプロテアーゼであり、細胞傷害性リンパ球の顆粒に貯蔵され、免疫シナプス形成時に放出されて標的細胞の損傷および炎症性シグナル伝達を促進します。ウシの系では、GZMA活性は、カスパーゼ非依存性細胞死、ミトコンドリア機能の攪乱、核酸損傷応答に影響し得るプロテオリシス（タンパク質分解）プログラムに関与することで、細胞性免疫に寄与します。直接的な細胞傷害作用に加え、グランザイムAは、白血球の動員や抗原依存性応答を形作るサイトカインネットワークおよび自然免疫経路の調節とも関連づけられています。グランザイム依存的エフェクター機能の変化は、獣医免疫学および比較免疫学における免疫調節異常、慢性炎症、宿主—病原体相互作用の研究において重要です。

granzyme A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（bovine）は、bovine細胞株における遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、granzyme Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、granzyme Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• granzyme Aの機能に不可欠なエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• granzyme A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（bovine）およびgranzyme A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（bovine2）によってコードされるgRNAは、遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  granzyme A HDRプラスミド（bovine）および granzyme A HDRプラスミド（bovine2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定の標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。