Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
Nicht CRISPR-Daten: Das Bild veranschaulicht die Qualität von Antikörpern zur Visualisierung von CRISPR-Experimentergebnissen.
granzyme A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine): sc-437323
- Zielspezies: bovine
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- granzyme A Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (bovine) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im granzyme A-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
granzyme A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine) | sc-437323 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Granzyme A (GZMA) ist eine tryptische Serinprotease, die in den Granula zytotoxischer Lymphozyten gespeichert und während der Bildung der immunologischen Synapse freigesetzt wird, um Zielzellschädigung und entzündliche Signalgebung zu fördern. In bovinen Systemen trägt die GZMA-Aktivität zur zellvermittelten Immunität bei, indem sie an proteolytischen Programmen beteiligt ist, die kaspaseunabhängigen Zelltod, mitochondriale Störungen und nukleinsäurebezogene Schadensantworten beeinflussen können. Über die direkte Zytotoxizität hinaus wird Granzyme A mit der Modulation von Zytokinnetzwerken und angeborenen Immunwegen in Verbindung gebracht, die die Rekrutierung von Leukozyten und antigengetriebene Antworten prägen. Veränderte granzymeabhängige Effektorfunktionen sind relevant für Untersuchungen zur Immundysregulation, chronischer Entzündung und Wirt-Pathogen-Interaktionen in der Veterinär- und vergleichenden Immunologie.
Das granzyme A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (bovine) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des -Gens in bovine-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des -Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die granzyme A-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von -defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der granzyme A-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf -Exone abzielen, die für die granzyme A-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere -Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom granzyme A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (bovine) und vom granzyme A CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (bovine2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des -Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das granzyme A HDR-Plasmid (bovine) und granzyme A HDR-Plasmid (bovine2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von -Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten -Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.