GPS2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406290
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GPS2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GPS2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GPS2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406290 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O supressor da via de proteína G 2 (GPS2) é uma proteína adaptadora multifuncional que regula a transcrição dependente de sinais e integra estímulos de estresse, inflamatórios e metabólicos. É mais conhecido como componente do complexo correpressor de receptor nuclear (NCoR)/SMRT–HDAC3, no qual modula o estado da cromatina e reprime programas de expressão gênica a jusante de vias como a sinalização de TNF/NF-κB e MAPK. O GPS2 também contribui para o controle da sinalização retrógrada mitocondrial e da proteostase ao coordenar processos dependentes de ubiquitina e respostas transcricionais ao estresse celular. A atividade desregulada de GPS2 tem sido associada a alterações na expressão de genes inflamatórios e a fenótipos metabólicos, apoiando seu uso como um ponto central para o estudo da corregulação transcricional em contextos relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPS2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GPS2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GPS2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GPS2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPS2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GPS2 para a investigação da sinalização de GPS2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GPS2 críticos para a função GPS2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GPS2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GPS2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GPS2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GPS2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GPS2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GPS2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GPS2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GPS2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.