GPR55 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-432690

概要

マウスGpr55はGPR55をコードしており、GPR55はエンドカンナビノイド関連シグナル伝達ネットワークで広く研究されているオーファンGタンパク質共役受容体（GPCR）で、リゾホスファチジルイノシトールなどの脂質メディエーターに応答します。GPR55はGα12/13やGαqに共役し、下流のRhoA–ROCK経路およびPLCβ–Ca2+経路を介して、細胞骨格の再構築、細胞移動、ならびにMAPK/ERKシグナルを含む転写プログラムに影響を与えます。免疫系および間質系の文脈では、GPR55活性は炎症性シグナルの調節、破骨細胞／骨芽細胞バランス、神経興奮性の制御との関連が示されています。GPR55関連シグナルの異常は、疼痛、代謝表現型、骨疾患、炎症に伴う組織リモデリングのモデルで検討されており、GPCR経路研究における機序解明の結節点としての有用性が支持されています。

GPR55 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるGpr55遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Gpr55内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Gpr55のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GPR55タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GPR55シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Gpr55欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GPR55の機能に不可欠なGpr55エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Gpr55ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GPR55 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGPR55 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Gpr55遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GPR55 HDRプラスミド（m）および GPR55 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGpr55ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGpr55標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。