GPR55 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432690

Descripción general

El gen murino **Gpr55** codifica **GPR55**, un receptor huérfano acoplado a proteína G (GPCR) ampliamente estudiado en la red de señalización relacionada con el sistema endocannabinoide y sensible a mediadores lipídicos como el lisofosfatidilinositol. GPR55 se acopla a **Gα12/13** y **Gαq**, y a las vías descendentes **RhoA–ROCK** y **PLCβ–Ca2+**, influyendo en la remodelación del citoesqueleto, la migración y programas transcripcionales, incluida la señalización **MAPK/ERK**. En contextos inmunitarios y estromales, la actividad de GPR55 se ha relacionado con la modulación de la señalización inflamatoria, el equilibrio osteoclasto/osteoblasto y la excitabilidad neuronal. La desregulación de la señalización asociada a GPR55 se ha investigado en modelos de dolor, fenotipos metabólicos, trastornos óseos y remodelación tisular asociada a la inflamación, lo que respalda su uso como nodo mecanístico en la investigación de vías de GPCR.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GPR55 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Gpr55 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Gpr55 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Gpr55 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GPR55.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Gpr55 para la investigación de la señalización de GPR55, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Gpr55 críticos para la función de GPR55
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Gpr55 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GPR55 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido GPR55 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Gpr55. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GPR55 (m) y el plásmido HDR GPR55 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Gpr55 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Gpr55 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.