GPR19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407000

Visão geral

GPR19 codifica um receptor órfão acoplado à proteína G que se localiza predominantemente na membrana plasmática e acredita-se que se acople a proteínas G heterotriméricas para influenciar a sinalização por segundos mensageiros e programas de transcrição a jusante. Embora seu ligante endógeno ainda não esteja completamente definido, a atividade de GPR19 tem sido associada à regulação da excitabilidade celular, da sinalização metabólica e ao controle, dependente do contexto, da proliferação e diferenciação. Vias mediadas por GPCR associadas ao GPR19 podem convergir com a sinalização de cAMP/PKA, MAPK/ERK e dependente de cálcio, moldando decisões de estado celular e respostas ao estresse. Alterações no panorama de sinalização por GPCR, incluindo a expressão desregulada de receptores órfãos como o GPR19, vêm sendo investigadas em condições multifatoriais que abrangem neurobiologia, inflamação e fenótipos relacionados ao câncer, sustentando sua relevância para estudos mecanísticos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GPR19 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GPR19 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GPR19, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GPR19 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GPR19.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GPR19 para a investigação da sinalização de GPR19, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GPR19 críticos para a função GPR19
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GPR19 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo GPR19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GPR19 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GPR19. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo GPR19 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GPR19 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GPR19 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GPR19 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.