Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
Plasmide Double Nickase (h) GM130: sc-400787-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GM130 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GM130 Double Nickase (h) et le plasmide GM130 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GOLGA2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GM130 Antibody (H-7): sc-55590
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GM130 | sc-400787-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GM130 | sc-400787-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GOLGA2 code la protéine de la matrice du cis-Golgi GM130, une plateforme d’échafaudage centrale pour l’organisation du ruban golgien et l’amarrage des vésicules, qui soutient l’efficacité du transport du RE vers le Golgi et l’empilement des citernes. GM130 coopère avec des facteurs d’amarrage et des réseaux de trafic régulés par de petites GTPases afin de maintenir l’architecture du Golgi pendant l’interphase et de favoriser sa réassemblage après la mitose, influençant la sécrétion polarisée et le positionnement des organites. Par ses rôles dans le trafic membranaire, la maturation des protéines et la dynamique du Golgi liée au cycle cellulaire, une altération de la fonction de GM130 est pertinente pour les réponses au stress cellulaire, les phénotypes de migration et des perturbations de la structure golgienne associées à des maladies, rapportées dans de multiples contextes biologiques.
GM130 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GOLGA2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GOLGA2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GOLGA2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GOLGA2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.