Glutathione Peroxidase 2/GPX2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406827

Übersicht

GPX2 kodiert die Glutathionperoxidase 2, ein selenabhängiges antioxidatives Enzym, das Wasserstoffperoxid und Lipidhydroperoxide unter Verwendung von Glutathion als Elektronendonor reduziert und dadurch oxidativen Schaden begrenzt sowie die Redox-Homöostase aufrechterhält. Die GPX2-Aktivität ist mit der zellulären Peroxid-Entgiftung und dem Glutathionstoffwechsel verknüpft, beeinflusst ROS-abhängige Signalwege und schützt Membranen vor Lipidperoxidation. In menschlichen Geweben ist GPX2 besonders mit der Biologie epithelialer Barrieren und Stressantworten assoziiert; eine veränderte Expression wurde mit entzündungsgetriebenem oxidativem Stress und fehlregulierten Proliferationsprogrammen in Verbindung gebracht. Eine Störung von GPX2 kann daher Signalwege beeinträchtigen, die das Redox-Gleichgewicht, das Überleben von Zellen unter oxidativer Belastung und kontextabhängige transkriptionelle Antworten auf ROS steuern.

Das Glutathione Peroxidase 2/GPX2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des GPX2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des GPX2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von GPX2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Glutathione Peroxidase 2/GPX2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von GPX2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Glutathione Peroxidase 2/GPX2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf GPX2-Exone abzielen, die für die Glutathione Peroxidase 2/GPX2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere GPX2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Glutathione Peroxidase 2/GPX2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Glutathione Peroxidase 2/GPX2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des GPX2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Glutathione Peroxidase 2/GPX2 HDR-Plasmid (h) und Glutathione Peroxidase 2/GPX2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von GPX2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten GPX2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.