Glutathione Peroxidase 2/GPX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406827

概要

GPX2は、セレン依存性の抗酸化酵素であるグルタチオンペルオキシダーゼ2をコードしており、グルタチオンを電子供与体として過酸化水素および脂質ヒドロペルオキシドを還元することで、酸化的損傷を抑え、レドックス恒常性の維持に寄与します。GPX2の活性は、細胞内の過酸化物解毒およびグルタチオン代謝と連動し、ROS依存性シグナル伝達を調整するとともに、脂質過酸化から膜を保護します。ヒト組織では、GPX2は上皮バリアの生物学およびストレス応答と強く関連しており、その発現異常は、炎症に起因する酸化ストレスや、制御不全の増殖プログラムと結び付けられてきました。したがってGPX2の攪乱は、レドックスバランス、酸化ストレス下での細胞生存、ならびにROSに対する状況依存的な転写応答を制御する経路に影響を及ぼし得ます。

Glutathione Peroxidase 2/GPX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGPX2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GPX2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GPX2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Glutathione Peroxidase 2/GPX2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Glutathione Peroxidase 2/GPX2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GPX2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Glutathione Peroxidase 2/GPX2の機能に不可欠なGPX2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GPX2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Glutathione Peroxidase 2/GPX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGlutathione Peroxidase 2/GPX2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GPX2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Glutathione Peroxidase 2/GPX2 HDRプラスミド（h）および Glutathione Peroxidase 2/GPX2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGPX2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGPX2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。