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Glutathione Peroxidase 1/GPX1双切口酶质粒(m) | sc-420662-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Gpx1 编码谷胱甘肽过氧化物酶 1(GPX1),这是一种硒依赖性的抗氧化酶,利用谷胱甘肽还原过氧化氢和脂质氢过氧化物,从而限制蛋白质、脂质和 DNA 的氧化损伤。GPX1 活性有助于维持细胞氧化还原稳态,并与谷胱甘肽代谢、过氧化物解毒以及应激响应型信号通路相互交织,这些通路会影响线粒体功能和炎症反应。GPX1 表达或活性异常与多种与氧化应激相关的表型有关,这些表型涉及代谢功能障碍、神经退行性变和心血管病理过程,其中 ROS 处理失衡会导致细胞损伤。作为一种广泛表达的细胞质/过氧化物酶体酶,GPX1 常被研究为连接氧化还原平衡、基因调控与适应性应激反应的关键节点。
Glutathione Peroxidase 1/GPX1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Gpx1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Gpx1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Gpx1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Gpx1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。