GluR-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403848-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GluR-3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GluR-3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GluR-3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GRIA3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GluR-3 Anticorpo (1D2E2): sc-517202
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GluR-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403848-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GluR-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403848-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRIA3 codifica a subunidade 3 do recetor ionotrópico de glutamato do tipo AMPA (GluR-3) humano, um canal catiónico ativado por ligando que medeia a transmissão sináptica excitatória rápida no sistema nervoso central. A GluR-3 contribui para a plasticidade sináptica dependente da atividade por meio do tráfego de recetores, da fosforilação e de interações com proteínas de ancoragem da densidade pós-sináptica, ligando-a a cascatas de sinalização dependentes de cálcio e à excitabilidade das redes neuronais. A função do recetor AMPA dependente de GRIA3 cruza-se com vias de neurotransmissão glutamatérgica que regulam a aprendizagem, a memória e as respostas ao stress excitatotóxico. Perturbações genéticas e funcionais das subunidades do recetor AMPA, incluindo GRIA3, têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, sustentando a sua utilização em estudos mecanísticos de disfunção sináptica.
GluR-3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GRIA3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GRIA3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GRIA3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GRIA3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.