Glucose Transporter Glut5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-425193

概要

Slc2a5 はグルコーストランスポーター Glut5（GLUT5）をコードしている。GLUT5 はフルクトースに高い特異性を示す促進拡散型ヘキソーストランスポーターで、腸管上皮などの組織において管腔側（頂端膜）からのフルクトース取り込みを担い、炭水化物の処理に寄与する。フルクトース流入を調節することで、GLUT5 は細胞のエネルギー代謝を支え、解糖系フラックスやその下流にある脂質合成経路にも影響を与え、栄養供給状況を代謝リモデリングへと結び付ける。SLC2A5/GLUT5 発現の変化は、食事に応答する代謝表現型と関連することが示されており、腸管吸収、肝代謝、腫瘍細胞における栄養利用といった文脈でしばしば検討される。マウスモデルでは、Slc2a5 はフルクトース輸送が全身のエネルギーバランスや微小環境での代謝ストレスにどのような影響を及ぼすかを解析するうえで扱いやすい標的となる。

Glucose Transporter Glut5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるSlc2a5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Slc2a5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Slc2a5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Glucose Transporter Glut5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Glucose Transporter Glut5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Slc2a5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Glucose Transporter Glut5の機能に不可欠なSlc2a5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Slc2a5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Glucose Transporter Glut5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGlucose Transporter Glut5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Slc2a5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Glucose Transporter Glut5 HDRプラスミド（m）および Glucose Transporter Glut5 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSlc2a5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSlc2a5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。