Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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GHR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420549
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GHR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GHR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GHR Anticorpo (B-10): sc-137185
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GHR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420549 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O receptor do hormônio do crescimento (GHR), codificado pelo gene **Ghr** de camundongo, é um receptor de citocina de passagem única na membrana que medeia a sinalização do hormônio do crescimento para regular o crescimento somático, o metabolismo e a homeostase endócrina. A dimerização do receptor induzida pelo ligante ativa a JAK2 e programas transcricionais a jusante mediados por STAT5, com crosstalk adicional com as vias PI3K–AKT e MAPK, que influenciam a proliferação, o manejo de nutrientes e a sobrevivência celular. A sinalização dependente de GHR molda a produção hepática de IGF-1 e a sensibilidade sistêmica à insulina, conectando a atividade do receptor a fenótipos de crescimento e metabólicos. A disfunção do eixo GH–GHR é relevante para pesquisas sobre distúrbios do crescimento, resistência à insulina e remodelamento tecidual em contextos endócrinos e do desenvolvimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GHR (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ghr em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ghr, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ghr na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GHR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ghr para a investigação da sinalização de GHR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ghr críticos para a função GHR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ghr para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GHR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GHR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ghr. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GHR Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GHR (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ghr para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ghr definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.