Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
GATA-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400396
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GATA-1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GATA-1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GATA-1 Anticorpo (N6): sc-265
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GATA-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400396 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GATA1 codifica o GATA-1, um fator de transcrição do tipo “zinc finger” que se liga a motivos WGATAR para controlar a expressão gênica específica de linhagem durante a hematopoiese. É essencial para a maturação eritroide e a diferenciação de megacariócitos, coordenando programas que regem a hemoglobinização, a saída do ciclo celular e a diferenciação terminal por meio de parcerias com cofatores como FOG1 (ZFPM1) e da modulação do remodelamento da cromatina. A atividade do GATA-1 integra-se à sinalização de eritropoetina/JAK–STAT e a redes transcricionais mais amplas para moldar a expressão gênica eritroide e plaquetária. A desregulação ou mutação de GATA1 tem forte relevância para distúrbios do desenvolvimento e da diferenciação de células sanguíneas, incluindo citopenias congênitas e leucemias mieloides caracterizadas por programas eritroides/megacariocíticos alterados.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GATA-1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GATA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GATA1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GATA1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GATA-1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GATA1 para a investigação da sinalização de GATA-1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GATA1 críticos para a função GATA-1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GATA1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GATA-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GATA-1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GATA1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GATA-1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GATA-1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GATA1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GATA1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.